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    硒處理對番茄采摘后成熟衰老生理品質的影響

    來源:原創論文網 添加時間:2020-04-15

      摘    要: 以番茄果實為試驗材料,研究亞硒酸鈉(Na2SeO3)處理對采后果實成熟衰老的影響,并通過測定果實外觀品質、營養物質含量、丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量及抗氧化酶活性,探討其作用機理。結果顯示,濃度為25 mg·L-1的Na2Se 3溶液浸泡處理后,在貯藏期第4天,對照組番茄的L*值含量為硒處理組的87.9%;在貯藏期第6天,硒處理組果實的MDA和可溶性固形物含量分別為對照組的54%和93%;在貯藏末期,果實硬度、可滴定酸、抗壞血酸(Vc)含量、過氧化氫酶(catalase,CAT)和過氧化物酶(peroxidase,POD)活性分別是對照組的1.24、1.26、1.12、1.67和1.61倍,說明硒可有效保持番茄的色澤、硬度等外觀品質,抑制Vc、可滴定酸等營養物質含量的下降,延緩MDA和可溶性固形物含量的上升,提高CAT、POD活性。

      關鍵詞: 硒; 番茄果實; 成熟衰老; 抗氧化;

      Abstract: To investigate the physiology effect of sodium selenite(Na2SeO3) on postharvest tomato fruit ripening and senescence, we used Na2SeO3 solution to treat tomato fruits The appearance quality, nutritional components, contents of malondialdehyde(MDA) and activities of antioxidant enzymes were tested to evaluate the mechanism of sodium selenite. The results showed that tomato fruits soaked treatment by 25 mg·L-1 Na2SeO3 solution lead L* value of control group decreased to 87.9% of Se-treated group at day 4. Contents of MDA and soluble solid of Se-treated group were 54% and 93% of control at day 6. Hardness, content of titratable acid, ascorbic acid(Vc), activities of catalase(CAT) and peroxidase(POD) were 1.24, 1.26, 1.12, 1.67 and 1.61 fold of control. These results indicated that 25 mg·L-1 Na2SeO3 could maintain the color and hardness of tomato fruit, inhibited the decrease of nutritional quality such as Vc, titratable acid, reduce the content of MDA and soluble solid, and increase the activity of CAT and POD.

      Keyword: selenium; tomato fruit; ripening and senescence; antioxidant capacity;

      番茄(Solanum lycopersicum)是茄科植物番茄屬,作為一種多年生草本植物,是國內外栽培最為普遍的果菜之一。番茄富含多種微量元素,同時兼具食用價值和藥用價值,經常食用可降低膽固醇含量、預防血栓、補血消炎、美容護膚等,是一種重要的農產品[1]。然而,番茄在采后貯藏及貯運過程中容易軟化腐爛,受到多種病菌侵染,影響其生理品質,從而減短了貨架壽命。衰老是自然界中一種普遍的生理規律,通常指生物的器官或整個個體生理功能逐漸衰退至最終死亡的過程。且果實是植物的生殖器官,在植物的成熟衰老過程中表現非常敏感。因此,尋求一種安全有效延遲番茄采后衰老進程的保鮮處理方式,是目前亟待解決的問題。

      果實衰老是一系列非常復雜的生理變化,生化衰老的主要特征是膜脂RNA、蛋白質等大分子物質的降解,分子水平上則表現出衰老相關基因表達量的上升。植物成熟衰老的外在變化及其內在本質的探究受到當前學者們的重視。目前,我國在該領域的研究獲得了一定的成果,如研究出了一些耐儲藏的植物品種和延緩早衰的轉基因水稻植株等,但現階段國內外研究植物衰老的試驗載體主要是擬南芥等模式植物以及水稻、小麥等經濟作物[2,3],而對果蔬衰老機理與保鮮技術等方面的研究較少。
     

    硒處理對番茄采摘后成熟衰老生理品質的影響
     

      硒(selenium)是人和動物必須的一種重要生命元素,其抗氧化機制可對機體起到保護作用,它也是植物中谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)的構成部分[4],可清除植物體內自由基,提高抗氧化酶活性。低濃度的硒可促進植物的生長發育,但過量的硒在植物中會產生毒性作用,抑制其生長活動和生理活性,所以硒的濃度決定了其功能。關于硒與果蔬的相互作用已有一些研究報道,例如低濃度硒浸種可促進番茄種子的萌發[1],葉面噴施適宜濃度的硒肥,對貯藏期桃、冬棗和草莓的呼吸強度和呼吸相關酶產生抑制作用,且對抗氧化酶活性有不同程度的提升[5,6,7,8,9,10]。薛竟一等發現葉面噴施不同濃度的硒,均可改善葡萄的Vc(抗壞血酸)含量、單粒重,果實橫縱徑、硒含量等果實品質,提高葉片葉綠素含量、含水量、可溶性蛋白含量以及SOD(超氧化物歧化酶)活性,從而延緩了果實葉片的衰老[11]。蘭敏等人的研究發現通過對小麥幼苗葉片噴硒可有效降低旗葉丙二醛(MDA)和游離脯氨酸的含量,提高小麥旗葉的抗氧化衰老能力,延緩小麥生理后期的衰老[12]。番茄果實作為重要的營養載體,采后貯藏過程中的進一步成熟和衰老及逆境脅迫導致的營養物質的流失和外觀品質的下降是極其復雜生理生化過程。嘗試將外源硒處理引入果實采后保鮮領域,對于豐富果實采后保鮮理論具有重要科學意義。另外,掌握硒對番茄果實成熟衰老的調控機理,有助于控制番茄果實成熟過程、改善番茄品種、提高果實品質以及增加果品的附加值等。為此,研究了硒處理對番茄采后成熟衰老生理品質的影響,以期為硒在番茄采后保鮮上的應用及同步生產富硒番茄果實研究奠定基礎。

      1、材料與方法

      1.1、試驗材料

      試驗用番茄果實,品種為“歐貝”,采自北京天安公司農場。挑選大小均一、無病蟲害和無機械損傷的果實,成熟度為完熟期至過熟期I之間(參照表1),用2%次氯酸鈉浸泡2 min消毒處理,流水沖洗,自然晾干,備用。亞硒酸鈉(Na2SeO3),分析純級,購自西隴化工有限公司。

      表1 番茄成熟指標
    表1 番茄成熟指標

      1.2、 方法

      通過預試驗發現果實浸泡處理優于果實表面噴施處理,并篩選出硒延緩番茄果實成熟衰老的最佳浸泡處理濃度為25 mg·L-1。因此,本研究所有試驗均采用25 mg·L-1的Na2Se O3浸泡處理。將試驗組和對照組各取60個果實,試驗組用25 mg·L-1的Na Se O3浸泡處理20 min,對照組用清水浸泡,晾干,果實放置于塑料筐中,用PE膜遮口包裝,保持95%左右的相對濕度,貯藏于20?C。每2 d各測定一次指標。

      1.3、 指標測定及方法

      果實硬度測定:每次測定取6個果實,硬度計探頭為圓柱形,直徑7 mm,末端平齊,在每個番茄果實赤道線部位3個相對不同位置以豎直方式插入測定,單位用N表示,貯藏過程中每隔1天測定1次。

      色差測定:固定6個番茄,編號,每次測量3個部位。

      可溶性固形物測定:采用PR-32α手持式數顯折光儀進行測量,取6個番茄果實的近果皮處果肉進行測量,以蒸餾水校準調零,可溶性固形物以%為單位表示,測定重復3次。

      可滴定酸測定:取果肉10.0 g,定容至100 mL,吸取20.0 m L濾液用0.1 mol·L-1的氫氧化鈉溶液進行滴定,滴定pH=8.1~8.3,重復3次。

      抗壞血酸(Vc)含量測定:采用鉬藍比色法測定,參照徐茂軍等[13]的方法。

      丙二醛(MDA)、過氧化物酶(POD)、過氧化氫酶(CAT)含量及活性測定:參照曹建康等的方法[14]。

      1.4 、數據分析

      試驗數據分析采用SPSS 13.0軟件,Duncan氏新復極差法進行差異顯著性分析。

      2 、結果與分析

      2.1 、硒處理對番茄果實硬度的影響

      番茄果實硬度是衡量果實品質及貨架期長短的指標之一,與采后貯藏保鮮特性有密切關系[15],由圖1可以看出,隨著貯藏時間的延長,各處理組番茄的硬度均下降,番茄成熟度在處理4 d后,均處于過熟期II及更成熟的階段。但在整個貯藏期間,硒處理組番茄的硬度始終高于對照組,延緩了果實軟化腐爛,提高了其商品性。在貯藏期第0~4天,各處理組番茄的硬度下降速度較為迅速,在貯藏第14天時,硒處理組番茄的硬度是對照組的1.24倍。由此說明Se處理可有效維持番茄的硬度,原因可能是硒可減緩番茄可溶性果膠含量的上升,保持了番茄較好的外觀品質。

      圖1 硒處理對采后番茄硬度的影響
    圖1 硒處理對采后番茄硬度的影響

      Figure 1 Effect of Se on hardness of postharvest tomato fruit

      2.2、 硒處理對番茄色澤的影響

      色差中L*值代表果實表皮的亮度[16],通常在貯藏期間果實亮度會逐漸降低,失去采前的色澤。由圖2A可知,各試驗組番茄的L*值均隨著貯藏時間的延長而下降,其中,硒處理組番茄的L*值始終高于對照組,且在第2天時出現峰值,與對照組之間呈現顯著性差異,在貯藏期第4天時,對照組番茄的L*值含量為硒處理組的87.9%。H=tan-1(b*·a*-1),代表色度角(Hue angle),是色調參數的指標之一,用來描述果實的顏色,其范圍在0~180之間,當H<50,數值越小,說明果實越紅,當H>50,數值越大,說明果實越綠[17]。圖2B表明,各試驗組番茄的H值均隨貯藏期的延長而上升,即番茄在采后期間逐漸轉紅。各試驗組番茄的H值均小于50,由此可知,數值越小表明番茄轉紅率越高。硒處理組番茄的H值在貯藏期第4天時與對照組差異性不顯著,而在貯藏期第10天時,對照組番茄的H值為44.35,Se處理組為46.95。由此說明,硒處理可有效延緩番茄采后色澤的改變,延長轉紅期,較好地維持了番茄良好的外觀品質。

      圖2 硒處理對番茄色澤變化的影響
    圖2 硒處理對番茄色澤變化的影響

      Figure 2 Effect of Se on color changes in tomato fruit

      2.3、 硒處理對番茄果實可溶性固形物的影響

      可溶性固形物主要指番茄果實中的可溶性糖類、礦物質、維生素、氨基酸等,其中可溶性糖類占主要成分,是判斷番茄成熟度一項重要指標[18],隨著番茄的成熟度增加,可溶性固形物的含量也隨之升高,但由于采后貯藏的營養供給缺失和果實呼吸作用的能量消耗,番茄的營養物質會逐漸損耗,可溶性固形物的含量也會降低。由圖3可知,在20℃貯藏條件下,硒處理組番茄可溶性固形物含量出現的峰值比對照延遲2 d出現,在貯藏期第8天,Se處理組番茄可溶性固形物含量為3.9%,對照組為4.26%,且整個貯藏期間,硒處理組番茄可溶性固形物的含量始終低于對照組,說明硒處理可有效降低采后番茄可溶性固形物含量的上升速率,對采后番茄的成熟衰老有一定的延緩作用。

      圖3 硒處理對番茄果實可溶性固形物的影響
    圖3 硒處理對番茄果實可溶性固形物的影響

      Figure 3 Effect of Se on total soluble solids of postharvest tomato fruit

      2.4 、硒處理對番茄果實可滴定酸的影響

      可滴定酸含量主要影響番茄果實口感和品質,由于番茄果實采后成熟度的增加,糖類物質含量上升,可滴定酸的含量會隨之降低。由圖4可知,各試驗組番茄的可滴定酸含量均呈現下降趨勢,在貯藏期第8~10天,各試驗組番茄可滴定酸含量下降明顯,可能是與番茄的呼吸速率相關。貯藏末期,Se處理組番茄的可滴定酸含量為174%,為對照組的1.26倍。Se處理組番茄的可滴定酸含量始終高于對照組,且可滴定酸含量下降速率比對照組減緩。因此,25 mg·L-1的Na2SeO3可較好的維持番茄可滴定酸含量,維持番茄的風味。

      圖4 硒處理對番茄果實可滴定酸含量的影響
    圖4 硒處理對番茄果實可滴定酸含量的影響

      Figure 4 Effect of Se on total acid content of postharvest tomato fruit

      2.5 、硒處理對番茄果實Vc含量的影響

      Vc即L-抗壞血酸,是重要的抗氧化劑,可清除番茄果實中的自由基,保護番茄細胞正常功能,是果實貯藏過程中評價營養品質的重要指標[19]。由圖5可知,各試驗組番茄果實Vc含量隨著貯藏時間的延長而下降,其中,在貯藏期第10天時,對照組番茄果實Vc含量下降最為明顯,在貯藏期第12天時,番茄的Vc含量僅為3.369 mg·100g-1,硒處理組番茄Vc含量為3.758 mg·100g-1,貯藏末期,對照組番茄果實Vc含量為硒處理組的89.5%。整個貯藏期間硒處理組番茄果實Vc含量下降14%,對照組下降24%。這說明硒處理能減緩采后番茄Vc的流失,保持番茄果實的營養價值與貯藏品質。

      圖5 硒處理對番茄果實Vc含量的影響
    圖5 硒處理對番茄果實Vc含量的影響

      Figure 5 Effect of Se on Vc content of postharvest tomato fruit

      圖6 硒處理對番茄果實MDA含量的影響
    圖6 硒處理對番茄果實MDA含量的影響

      Figure 6 Effect of Se on MDA content of postharvest tomato fruit

      2.6、 硒處理對番茄果實MDA含量的影響

      MDA是細胞膜脂的過氧化產物,它的產生意味著細胞膜受到損傷,直接導致番茄果實的衰老,通過測量MDA含量可了解番茄果實膜系統的損傷程度[20,21]。硒處理對番茄果實MDA含量的影響可見圖6。各試驗組MDA含量均為先上升后下降,但在第2天,硒處理組番茄果實MDA含量為0.90nmol·g-1(mF),高于對照組的0.72 nmol·g-1(mF),可能是由于硒處理刺激了番茄果實的膜系統,導致其MDA含量暫時的上升,隨著時間的延長,處理組番茄果實MDA的含量一直低于對照組,且處理組在第2~6天之間下降明顯,之后一直維持較低水平。總體來說,硒處理可以較好保護番茄的膜系統,減輕采后成熟衰老過程中的膜系統損傷。這一結果與Proietti在橄欖上的研究結果相符[22]。

      2.7、 硒處理對番茄果實POD活性的影響

      活性氧是導致番茄采后衰老的一個重要因素,植物體內過氧化物酶(POD)和過氧化氫酶(CAT)可協同配合來清除細胞中的H2O2,維持果實細胞內活性氧代謝平衡,在植物成熟衰老過程中有重要作用[23]。圖7為各試驗組采后番茄果實POD活性的變化情況,POD活性的變化趨勢總體相同,對照組番茄果實POD活性的活性從貯藏期第2天開始與硒理組出現差異,在貯藏期第8天,各試驗組番茄POD活性表現顯著性差異,硒處理組番茄果實POD活性達到峰值3.89 U·g·min-1,為對照組的1.63倍。由此可見,硒處理能提高番茄果實POD活性,加強細胞對活性氧自由的基清除力,保護膜結構系統的穩定,提高番茄抗逆性。

      圖7 硒處理對番茄果實POD活性的影響
    圖7 硒處理對番茄果實POD活性的影響

      Figure 7 Effect of Se on POD activity of postharvest tomato fruit

      圖8 硒處理對番茄果實CAT活性的影響
    圖8 硒處理對番茄果實CAT活性的影響

      Figure 8 Effect of Se on CAT activity of postharvest tomato fruit

      2.8、 硒處理對番茄果實CAT活性的影響

      CAT是植物體受逆境脅迫時的保護酶[24],同時也是清除活性氧最關鍵的酶,抗氧化酶的活性體現了番茄對逆境的耐受能力,與采后貯藏期的長短有一定關聯。圖8表明,硒處理后,番茄果實CAT活性明顯高于對照組,貯藏期間酶活有一定的浮動,但兩組浮動的趨勢相同,在貯藏第6~10天都有明顯下降,硒處理組番茄果實CAT活性分別為35.88U·g·min-1和25.86 U·g·min-1,對照組僅為2.79U·g·min-1和3.73 U·g·min-1,各試驗組番茄果實CAT活性呈現明顯差異,由此表明,硒處理可提高番茄果實CAT活性,減少自由基產生的危害作用。這一結果與前人的研究結果相符[25,26]。

      3、 討論與結論

      番茄采摘之后,仍然會進行一系列的生理代謝活動,果實硬度,Vc含量,MDA含量及抗氧化酶活性都會隨著貯藏時間的推移而不斷變化,逐漸使番茄失去商品性以及食用價值[18]。MDA的產生主要由于活性氧誘導脂膜產生過氧化作用,逆境脅迫下果實體內會產生較多的自由基和活性氧,對果實產生一系列的危害[26],而提高番茄果實抗氧化系統的穩定性,便能清除果實細胞中過多的活性氧和自由基,降低MDA的含量,緩解逆境脅迫導致的番茄果實品質的下降。

      目前,延緩番茄采后衰老的研究主要集中在化學方法上,但化學藥劑的安全性仍有待考證。硒作為植物有益的微量元素之一,通過一系列途徑進入植物體內,參與植物體循環代謝,結合生成各種硒復合物,如硒代半胱氨酸、硒代蛋氨酸等,同時提高植物體各種抗氧化酶的活性,增強植物的抗氧化能力。

      硒的存在形式有多種,植株可通過吸收外界無機硒將其轉化為有機硒,而有機硒可以添加至食品中,在人體中以硒蛋白的形式起到抗氧化、調控血脂代謝及預防心血管疾病等作用[27,28]。本研究所使用的無機硒通過番茄的一系列吸收代謝后,部分可轉化為有機硒,但番茄表皮仍有少量無機硒殘留,這點需要通過改變試驗方法,在以后的研究中將會使用更加安全的硒形式。

      本試驗結果表明:20℃條件下,25 mg·L-1的Na2SeO3浸泡處理番茄可有效提高番茄抗氧化酶活性,維持番茄外觀和營養品質。Na2SeO3稀釋后的水溶液有微毒,文中處理方法遠達不到LD50(大鼠經口)7 mg·kg-1,番茄浸泡后的無機硒及有機硒含量有待檢測,未來仍需通過水培和土培處理以保證硒處理的安全性。另外,盡管已有一些研究報道低濃度的硒在植物發育及脅迫反應中發揮著重要作用,但是硒在果蔬上的應用主要是通過分析酶活等生理指標來探討硒延緩植物成熟衰老的功能。下一步需將分子生物學、生物化學及形態學等多學科結合起來,對硒調控番茄果實成熟衰老的作用機制進行深入研究,同時也為其他果實成熟衰老的調控機制研究提供技術借鑒和理論依據。因此,硒在植物體內的代謝途徑仍需結合蛋白質組學、代謝組學等“組學”技術進行更深入的研究,以便為今后硒在果蔬采后保鮮上的應用及同步生產富硒果蔬技術產業化應用奠定基礎。

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